從1月26日週二起，所有搭乘航班進入美國的國際旅客都被要求出示核酸檢測陰性的證明。這是一道前總統特朗普兩週前簽署的行政命令，它要求所有通過飛機進入美國的旅客都必須在航班起飛前的3天以內進行新冠病毒核酸檢測，結果必須是陰性，也就是沒有新冠病毒，才可以登機前往美國。新上任的拜登總統在就職的第二天也公開宣布了這一措施。
美國總統拜登說：“除了佩戴口罩外，所有乘飛機從其他國家進入美國的人都需要在上飛機前、離開前進行測試。到了美國之後他們也需要進行隔離。”
這次的新規不只適用於外國人，也適用於美國公民和永久居民。所有搭乘飛機進入美國領土的乘客都必須在登機前對他們所搭乘的航空公司出示檢測結果，結果必須來自實驗室檢測或者由實驗室認可的檢測。檢測結果的證書需要包括被檢測人的身份，樣本採集的日期和測試的種類。
對於不是直達美國而是需要通過轉機的乘客來說，檢測需要在第一趟航班出發前的三天內完成，不過前提是這趟旅程的所有中轉航班是一次性預定的，而且每兩趟航班之間的間隔時間不能超過24小時。如果旅程包括的幾趟中轉航班是分開購買的，檢測需要在飛往美國的那趟航班出發前3天完成。
對於在前往美國前的3個月內得了新冠但已經康復了的乘客，他們需要出示新冠檢測陽性的證明以及來自醫生或者健康官員的旅行許可文件。對於出境後再次入境美國的間隔時間小於3天的乘客，可以在出境美國前在美國進行新冠檢測。
需要注意的是，26日開始實行的核酸檢測規定只適用於不受旅行限制的乘客。目前，任何一個過去14天內在中國、伊朗、歐洲的申根地區、英國、愛爾蘭、巴西的非美國公民就算新冠檢測呈陰性也依然不可以入境美國。
除了在美國疾病控制與預防中心的網站上可以了解這次規定的詳細內容外，美國各大國際航空公司也在自己的官網上公佈了這次規定。達美航空在網站上為乘客提供了搜索工具，幫他們定位所在國的檢測地點。
在一份向美國之音提供的聲明當中，美國旅行協會(US Travel Association)讚揚了新的規定，但同時呼籲解除正在實施的旅行限制。聲明說：“有了國際旅行檢測要求，國際旅客和返美居民被檢測的比例高於其他公共群體，傳播疾病的威脅也低得多。所以應該在同時解除國際旅行限制和隔離要求。”
